Das Purpur-Knabenkraut blüht in der Regel ab Anfang Mai bis Anfang Juni und gehört mit Wuchshöhen von bis zu 80 cm zu den größten einheimischen Orchideenarten. Es braucht kalk- oder zumindest basenreichen humushaltigen und lockeren Lehmboden in Gegenden mit warmem Klima. Es bevorzugt lichte Wälder und Gebüsche, die im Sommer trocken, im Winter aber gut durchfeuchtet sein sollten. Es kommt an seinen Standorten gelegentlich in kleinen, individuenarmen und sehr lockeren Beständen vor.
Gelegentlich kreuzt sich das Purpur-Knabenkraut mit dem Verwandten Helm-Knabenkraut, dann entstehen Hybride, die am Ende der Galerie zu sehen sind.
Das Purpur-Knabenkraut gilt als gefährdet.